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DAPI染液图片
产品货号:
KM0059
中文名称:
DAPI染液
英文名称:
4',6-Diamidino-2'-phenylindole
产品规格:
200μL(5mg/mL)|1mL(1mg/mL)
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
DAPI是一种蓝色荧光染料,选择性结合双链DNA的小沟区(优先结合AT富集的DNA)形成稳定的复合物,产生比DAPI约强20倍的荧光。DAPI的最大激发/发射波长为340/488nm,DAPI-DNA复合物的最大激发/发射波长为364/454nm,通常用作荧光显微术、流式细胞术和染色体染色的细胞核复染剂。由于对DNA的高亲和性,DAPI还常常被用在细胞计数、凋亡检测、支原体污染检测、基于DNA内含物的细胞分选,以及高内涵成像分析中的核分割工具。虽然高浓度情况下DAPI能够进入活细胞,但DAPI不具细胞膜渗透性,通常情况用来染固定细胞。对于活细胞染色,Hoechst 33342(货号:KM0013)是一种受欢迎的具细胞膜渗透性的核复染剂。

本制品有两种浓度的DAPI储存液,一种浓度为1mg/ml,一种浓度为5mg/ml。使用时根据实验应用直接将储存液用相应溶液稀释到工作浓度即可。推荐工作浓度通常为0.5-10μg/ml,用于固定的细胞和组织的细胞核染色。

主要参数:
CAS号:28718-90-3
保存:-20℃避光保存,1年有效。

注意事项:
1.DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2.DAPI储存液(1-5mg/ml)置于-20℃避光保存,1年稳定。稀释的工作液(1-5μg/ml),置于+4℃,6个月稳定。
3.荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
4.为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法:
一、工作液配制
  用双蒸水或PBS稀释母液,配制成所需要的工作浓度(0.5-10μg/ml)。
二、固定的细胞或组织染色
  对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色,则直接进行DAPI染色。
1.对于贴壁细胞或组织切片:加入适量DAPI染色液,覆盖住样品即可。
  对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5min。
2.吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5min。
3.直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=364/454nm。

常见问题分析:
1.DAPI是一种好的活细胞核标记探针?
解答:DAPI被认为是一种半渗透性/无渗透性的细胞核染料。对细胞核的染色性能好坏依赖于细胞系类型。某些细胞系可用DAPI染色,某些完全不可以,而某些标记结果不一致。替代的话,建议用Hoechst 33342(货号:KM0157-10ML)或Hoechst 33258(货号:KM0156),具有同DAPI一样的波长和核酸结合模式,但是有非常好的细胞膜渗透性。
2.DAPI和Hoechst染料相当类似,如何二选一?
解答:DAPI是非常通用的蓝色荧光染料,用于细胞核复染。对固定和透化的细胞/组织,具有非常明亮的细胞核标记。然而,此染料被认为是半渗透至不渗透的染料,用于活细胞染色的结合不一致。Hoechst 33342是一种细胞膜渗透性的染料,具有同DAPI的结合机制和荧光特征。非常适合用于活细胞成像,效果就如同DAPI用于固定细胞染色。
3.有学者发现,先进行EdU插入的点击反应后再用DAPI染细胞,比未进行点击反应直接用DAPI染色的信号低,是什么原因导致的?
解答:点击反应内的铜离子在很少程度上会变性DNA(虽然变性程度没有BrdU检测那么多),导致DNA染料(包括DAPI和Hoechst染料)的结合能力受到影响。这部分影响仅在经典的EdU试剂盒内表现明显,而对于第二代的EdU试剂盒(使用相对更低浓度的铜离子)基本无影响。
相关搜索:DAPI染液DAPIDAPI染色液4',6-Diamidino-2'-phenylindole28718-90-3
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